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小鼠胎鼠海马神经元原代培养

日期:2025-06-12 15:00
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摘要: 1、取怀孕18天小鼠,采用颈椎脱臼法处死,75%乙醇全身浸泡消毒; 2、超净台内,无菌条件下取胚胎,放入解剖液中清洗3次; 3、分离海马脑区,解剖液冲洗3次; 4、用弹簧剪将海马剪成1mm3大小,消化液37℃消化15-20min,每五分钟振荡一次; 5、去掉上清,加入种植液1终止消化,吹打10-15次,不能有气泡,70um滤网过滤; 6、计数; 7、按4 x 10^4 细胞/孔种入24孔板,37℃,5%CO2,95%饱和湿度的培养箱中培养5h; 8、5h后更换为种植液2继续培养;

1、取怀孕18天小鼠,采用颈椎脱臼法处死,75%乙醇全身浸泡消毒;

2、超净台内,无菌条件下取胚胎,放入解剖液中清洗3次;

3、分离海马脑区,解剖液冲洗3次;

4、用弹簧剪将海马剪成1mm3大小,消化液37℃消化15-20min,每五分钟振荡一次;

5、去掉上清,加入种植液1终止消化,吹打10-15次,不能有气泡,70um滤网过滤;

6计数

7、按4 x 10^4 细胞/孔种入24孔板,37℃,5%CO295%饱和湿度的培养箱中培养5h

85h后更换为种植液2继续培养;

沪公网安备 31011302004470号