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详细内容

卵巢早衰动物模型

临床的卵巢早衰(POF)是指卵巢功能提前减退,常见为女性在40岁以前出现闭经,以闭经,不育,雌**缺乏以及促性腺**水平升高为特征的一种**。在人群中发病率为1%~3%,在继发性闭经中占2%~10%,诊断以至少半年或半年以上闭经多次发生,排除其他原因为基础,卵巢早衰是妇科分泌领域的常见病。

POF病因多种多样,具体发病机制尚不清楚,为了寻找病因和有效的**方法,就建立与人类临床表现和发病机制相似的动物模型。国内外专家学者根据POF的病因的多样性建立了不同的动物模型

1 材料与方法

1.1 实验材料

雌性Wistar大鼠。

1.2 实验动物分组

本实验选用雌性Wistar大鼠40只,体重260~300 g,随机分成2组。正常对照组:20只。实验模型组:20只。

1.3 实验方法

1.3.1 POF大鼠模型制备 实验模型组雌性Wistar大鼠用雷公藤多甙片(10 mg/)0.6 mg/(100 g•d)体重,灌胃1/d,连续9 d,建立POF动物模型

1.3.2 组化标本制备

对实验动物用1%****钠(40 ml/kg)腹腔麻醉后开胸,经左心室70/min滴入1%肝素钠的生理盐水500 ml,同时剪开右心耳。继用0.1 m磷酸盐缓冲液(PBS,PH=7.4)配制的固定液(4%多聚甲醛)灌流固定。取出实验动物的卵巢组织,放入含4%多聚甲醛PBS的固定液中进行后固定大约2 h,之后将实验动物的卵巢组织切成薄片移入含20%蔗糖的PBS中。在4℃冰箱中存放,至组织薄片沉底,经水包埋,恒冷箱连续横切片,片厚20 μm。经OCT包埋,恒冷箱连续切片,片厚16 μm-70℃保存备用。

1.3.3 尼氏染色

冷冻切片吹干,经PBS漂洗5 min 3次,将切片置入1%甲苯胺蓝溶液中37℃孵育90 min,取出后用蒸馏水冲洗,PBS漂洗5 min 3次,梯度乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封片,光湿微镜下观察。

2 结果

尼氏染色结果:

正常对照组大鼠卵巢的尼氏染色切片上,卵泡数目正常,卵泡无闭锁,间质无明显增生。

实验模型组大鼠卵巢可见卵巢萎缩,卵泡数目减少,卵泡闭锁增多,间质增生明显。

根据尼氏染色结果证明POF动物模型制备成功。

3 讨论

由于POF的病因与发病机理尚不清楚,为了寻找此病的有效的**方法及发**展规律,建立切实可靠的POF模型显得由为重要。根据目前的各种造模结果来看,**型POF模型简单可靠,容易操作,可作为研究POF的模型,但是由于方法还不够成熟,需要更进一步的探讨**的剂量与给要时间以造出理想的模型。为临床的**提供有效数据,造模型的同时,更要探讨对其他一些器官的影响。如肝、肾、神经系统等,这会对人类的健康具有更大的意义。

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