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如何选择PBS的清洗方式、次数和时间？
日期：2024-04-26 14:46
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摘要：
1、单独冲洗，防止交叉反应造成污染：
每天检测的病例很多，所用的抗体种类及项目也多，如果在加入一抗孵育完后，将它们在一个缸内洗，这样就会造成交叉污染，影响后的结果。正确的做法是单独地进行冲洗，冲洗的 PBS 为一次性，切片没有相互交叉污染的机会。
2、温柔冲洗，防止切片的脱落：
冲洗切片，取出切片，将 PBS 从上轻轻地冲洗，让 PBS 自上而下流下来，不要拿起切片将 PBS 对准切片冲洗，这样由于冲出的 PBS 有的冲击力，很容易使切片周边引起松动，导致切片的脱落。
3、冲洗的时间...
1、单独冲洗，防止交叉反应造成污染：
每天检测的病例很多，所用的抗体种类及项目也多，如果在加入一抗孵育完后，将它们在一个缸内洗，这样就会造成交叉污染，影响后的结果。正确的做法是单独地进行冲洗，冲洗的 PBS 为一次性，切片没有相互交叉污染的机会。
2、温柔冲洗，防止切片的脱落：
冲洗切片，取出切片，将 PBS 从上轻轻地冲洗，让 PBS 自上而下流下来，不要拿起切片将 PBS 对准切片冲洗，这样由于冲出的 PBS 有的冲击力，很容易使切片周边引起松动，导致切片的脱落。
3、冲洗的时间要足够，才能洗去结合的物质：
冲洗切片有人提出用微振荡器振染，振下未结合的各种物，使之不产生背景，此种做法一是浪费时间，二是很容易导致切片的脱落。切片的冲洗据实践认为，用一小烧杯柔和地于切片上冲洗，就能冲洗去未结合的物质，无需附加其它条件，冲洗好于切片上再注入 PBS，持续 2 min 左右就足够了。
4、PBS 的 pH 和离子强度的使用和要求：
业内人士曾指出：中性及弱硷性条件（pH7-8）有利于免疫复合物的形成，而酸性条件则有利于分解；低离子强度有利于免疫复合物的形成，而高离子强度则有利于分解。我们常用的 PBS 的 pH 在 7.4-7.6 ，浓度是 0.01 M，根据本室十几年来的使用情况，认为该溶液价格便宜配制方面，使用效果好。
5、常用试剂的配制和使用：
在免疫组织化学的染色过程中，用得多的试剂就是缓冲液，因为切片在整个染色中，抗体的加、换、切片的冲洗，DAB 的配制都离不开缓冲液。可见缓冲液在整个染色中都起至关键的作用，缓冲液的过酸或偏碱，都将影响染色的结果。
