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成年小鼠关节软骨细胞原代培养
日期：2025-05-01 21:10
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摘要：上海达为科生物科技有限公司，位于上海长江软件园，公司目前具备较好的生物学、医学技术服务平台，能够为广大客户提供医学科研样本检测、合作研究、开发及生产服务。 我们拥有专业的实验室、先进的实验设备和经验丰富的科研技术人员。技术团队包括研究员（博士后）2人，助理研究员（博士）4人，核心研究员（硕士）15人，致力于动物模型、动物实验、动物实验外包、整体实验外包，细胞实验、细胞实验外包、整体毕业课题等等。
1. C57小鼠，8-10周，通过颈椎脱位处死，浸入75%乙醇浸泡5分钟，转移到通风柜中的解剖盘中。
2. 使用眼科剪和镊子，使髋关节脱臼，保持股骨头完整。
3. 用止血钳去除每个股骨头的软骨帽，将组织放入含2%双抗的PBS中。
4. 用冰冷的含2%双抗的PBS清洗2-3遍，将关节软骨小心移到2ml离心管中。
5. 用眼科剪刀将软骨帽剪成约1mm3的碎片，加入3ml预热的Collagenase D（1.5mg/ml）。
6. 放入37℃、80rpm的摇床中进行**次消化，时间2h 。
7. **次消化结束后，加入含血清的培养基终止消化，40um的细胞筛过滤后，离心1500rpm，2min。
8. 沉淀用DMEM完全培养基重悬，计数，种植在24孔板中。
9. 在未消化的组织中加入3ml预热的Collagenase D，放入37℃、80rpm的摇床中进行**次消化，时间2h，然后收集细胞。
