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移植性肿瘤模型是将肿瘤细胞或组织移植到实验动物体内建立的肿瘤模型。
一、类型
1. 同种移植模型
- 将同一物种的肿瘤细胞或组织移植到同种动物体内。
- 例如,将小鼠的肿瘤细胞移植到其他小鼠体内。
- 优点是遗传背景相似,免疫排斥反应相对较弱。
2. 异种移植模型
- 将不同物种的肿瘤细胞或组织移植到实验动物体内。
- 常用的是将人类肿瘤细胞移植到免疫缺陷动物(如裸鼠、SCID 小鼠等)体内。
- 能更好地模拟人类肿瘤的生物学特性,但可能存在物种差异。
二、建立方法
1. 细胞移植
- 体外培养肿瘤细胞,然后将细胞悬液注射到实验动物体内。
- 可通过皮下注射、腹腔注射、静脉注射等方式进行。
2. 组织块移植
- 将新鲜的肿瘤组织切成小块,移植到实验动物体内。
- 通常采用皮下移植或原位移植(将肿瘤组织移植到与人类肿瘤发生部位相似的动物器官中)。
三、应用
1. 药物筛选
- 测试抗肿瘤药物的疗效和毒性。
- 可快速评估大量药物,为临床**提供参考。
2. 机制研究
- 研究肿瘤的生长、转移机制以及肿瘤与宿主的相互作用。
3. **方法评估
- 评估放疗、化疗、免疫**等不同**手段的效果。
四、优点
1. 肿瘤发生率高
- 由于是人为移植肿瘤细胞或组织,肿瘤发生率相对较高。
2. 生长速度相对稳定
- 便于观察和测量肿瘤的生长情况。
3. 可重复性好
- 实验条件相对可控,结果的可重复性较高。
五、局限性
1. 与人类肿瘤存在差异
- 虽然异种移植模型能在一定程度上模拟人类肿瘤,但仍存在物种差异。
2. 免疫缺陷动物的使用
- 异种移植模型通常需要使用免疫缺陷动物,可能无法完全反映正常免疫状态下的肿瘤发展。
总之,移植性肿瘤模型在肿瘤研究中具有重要价值,但在使用时需要充分考虑其优缺点,结合其他模型和方法进行综合研究。
六、细胞移植皮下注射具体步骤
首先准备好要移植的肿瘤细胞(细胞量根据不同肿瘤略有不同,我们所用的前列腺癌细胞系每个移植点一般选择 1x106 左右;肿瘤细胞可与基质胶 1:1 混匀后用 1 ml 注射器吸取,基质胶能够给肿瘤细胞提供营养环境,有助于肿瘤细胞生长)。
戴无菌手套后,将小鼠用左手大拇指和食指捏住颈部皮肤,然后将鼠尾用左手无名指和小指固定于左手大鱼际。将腋窝或腹股沟用 75% 酒精消毒 3 次。右手持吸有肿瘤细胞和基质胶混合液的注射器,在腹股沟或腋窝的位置,45°斜角进针,注意不要突破腹膜,将针头保持于皮下位置。
然后近水平位置将针头几乎wan全插入皮下,将混有基质胶的肿瘤细胞注射入皮下(肿瘤细胞量约 1x106),快速退针,左手食指轻压针孔约 1 min 后将小鼠放回饲养笼中,注意将小鼠侧放于垫料上,放置其不适呕吐时呕吐物误入呼吸道引起窒息。2~3 h 后观察小鼠是否苏醒。
如果是利用肿瘤组织(人体肿瘤标本或小鼠移植瘤传代)建立裸鼠皮下移植瘤模型,则需要首先将肿瘤组织用无菌 PBS(或 1640 培养基)洗涤 3 次,然后在无菌平皿上切成或用无菌剪刀剪成<1 mm3 体积的小块(种植前可裹基质胶)备用。
将小鼠用水he氯醛麻醉后平卧于解剖板上,四肢用胶带固定,将腋窝或腹股沟用 75% 酒精消毒 3 次,然后用眼科剪剪开约 0.5 cm 小口,小镊子将皮下筋膜与皮肤分开,然后将肿瘤组织放入贴近腹股沟或腋窝的深部,每个位置放置 2~3 块肿瘤组织,注意不同组间统一放置肿瘤组织块数以保持一致。
然后缝合皮肤,消毒后将小鼠侧卧位放置于饲养笼的垫料上。2~3 h 后观察小鼠是否苏醒。
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