智启医学新维度
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蛋白质**定量是确定样品中特定蛋白质准确含量的方法。
一、常用方法
1. 同位素标记法
- 如利用稳定同位素标记的氨基酸(如 SILAC)掺入细胞培养中,通过比较标记与未标记样品中蛋白质的信号强度比例来确定**量。
- 或者使用同位素标记的内标肽段在质谱分析中进行定量。
2. **定量蛋白质组学(AQUA)
- 合成含有稳定同位素标记的特定肽段作为内标,与样品一起进行质谱分析,根据内标肽段和目标肽段的信号强度比来确定蛋白质的**量。
二、应用领域
1. 生物医学研究
- 研究疾病发**展过程中特定蛋白质的变化,有助于了解疾病机制。
- 药物研发中,确定药物作用靶点的蛋白质含量变化。
2. 生物技术产业
- 蛋白质药物的质量控制,确保药物中有效成分的准确含量。
- 工业酶制剂的生产中,监控酶蛋白的产量。
举例:经典的蛋白质**定量主要依赖于抗体和重组蛋白质标准品,例如ELISA。研究人员利用串联质谱仪进行多蛋白质同时**定量的新方法-MRM/PRM。 MRM/PRM是质谱技术的一种扩展,用于对特定的蛋白质或肽进行高灵敏度和高选择性的定量分析。特别适合于生物样本中低丰度蛋白质的检测。这种方法在蛋白质组学研究中具有重要意义,尤其是在寻找生物标志物和研究疾病机制方面。
血液中6种蛋白质同时进行MRM分析