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  • 产品名称:TTC染色技术服务

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简单介绍:
TTC 是一种无色的氧化还原指示剂,在活细胞内的脱氢酶作用下被还原成红色的甲臜(Formazan)产物。而死细胞由于缺乏脱氢酶活性,不能将 TTC 还原,因此不会被染色。
详情介绍:

TTC2,3,5-氯化三苯基四氮唑)染色法是一种用于检测组织中活性细胞的染色方法。

 

一、染色原理

 

TTC 是一种无色的氧化还原指示剂,在活细胞内的脱氢酶作用下被还原成红色的甲臜(Formazan)产物。而死细胞由于缺乏脱氢酶活性,不能将 TTC 还原,因此不会被染色。

 

二、应用领域

 

1. 脑缺血研究:

- 在脑缺血动物模型中,通过 TTC 染色可以清晰地显示出缺血区域和正常组织的界限。缺血区域的脑组织由于缺乏血液供应,细胞代谢受到影响,脱氢酶活性降低,不能将 TTC 还原,呈现白色;而正常组织中的细胞具有活性,能将 TTC 还原成红色。

- 用于评估脑缺血损伤的程度和范围,为研究脑缺血的病理生理机制和**方法提供重要依据。

2. 心肌梗死研究:

- 在心肌梗死动物模型中,TTC 染色可以区分梗死区域和正常心肌组织。梗死区域的心肌细胞由于缺血缺氧而死亡,不能将 TTC 还原,呈现白色;正常心肌组织中的细胞具有活性,能将 TTC 还原成红色。

- 帮助研究心肌梗死的病理生理过程,评估**方法对心肌梗死的疗效。

3. 其他组织研究:

- 也可用于其他组织如肝脏、肾脏等的活性检测,判断组织的损伤程度和存活情况。

 

三、新鲜组织切片制备及染色实验步骤


1、取材:动物麻醉后立即取新鲜组织(如脑、心脏) ,不经固定液固定,将组织直接放入-200速冻20-30min,如果不急用,可以暂时放置-80°C冻存。
2、组织块切片:将冻好的组织稍解冻,用莱卡刀片手动切片,厚度2-3mm为宜,切面整齐。
3、TTC染色:将切片放入提前预热好的的TTC孵育液中,放入37C水浴锅中避光孵育15-30min,间隔5-8min轻轻摇动组织,使其均匀接触到染色液,并观察染色结果。
4、拍照:组织成色后,加入固定液终止反应,并避光保存组织, 照相机拍照。

TTC染色判读:
组织正常区呈红色,梗死区呈苍白色。

、注意事项:
1、标本越新鲜越好,勿固定,刀片宜薄而锋利, 在冰箱中速东的时间以能顺利切片为宜,保持切片平整。
2、染色后的标本浸存于国定液中避光保存,染色结果能保存数月 ,在阳光下易褪色;
3、TTC染色波避光4°C可保存一个月,使用前先复常温。

 

 

 

、优缺点

 

1. 优点:

- 操作简单:染色步骤相对简单,不需要复杂的仪器设备。

- 特异性高:能够特异性地检测组织中的活性细胞,与死细胞区分明显。

- 直观性强:染色结果直观,通过颜色的差异可以清晰地看到活性细胞和死细胞的分布。

2. 缺点:

- 只能检测细胞活性,不能提供关于细胞功能的详细信息。

- 对于某些组织,如含有大量色素或脂肪的组织,染色效果可能不佳。

- TTC 溶液的稳定性较差,需要现配现用,且染色过程中需要严格控制温度和时间,以确保结果的准确性。

 

七、达为科实验服务

分子实验平台:高效运作了qRT-PCR、Western blot、双向电泳技术、分子克隆与质粒构建、流式细胞仪检测、免疫共沉淀、染色质免疫共沉淀、RNA免疫沉淀、凝胶电泳迁移实验、酶联免疫吸附测定、外泌体抽提及鉴定等实验。

基因组学平台:可以完成甲基化检测、基因芯片分析、高通量测序等实验。

蛋白组学平台:能实现LC-MS、ITRAQ、蛋白质修饰分析等重点实验项目。

病理学平台:涉及免疫荧光染色、免疫组织化学染色、HE染色、特殊染色等实验。

生物信息学分析:文本挖掘芯片表达谱分析序列分析转录因子靶点预测,高通量测序数据分析等项目

临床前CRO服务:主要提供呼吸系统、神经系统、免疫系统性疾病的药效学评价服务,包括靶点验证、体内外模型的构建、药物筛选、药物分析、药效性评价、药代动力学和药理学研究以及院内制剂研发等。

项目转化服务:助力客户进行方案设计、联合课题申报、药物项目引进和孵化,解决客户对实验技术平台、专业人才、zhuanli申请和融资的需求;

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