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上海达为科致力于大鼠关节炎模型实验,有多年的大鼠关节炎造模经验,可以为您提供上等的模型,为您的实验保驾护航。
1、主要的大鼠关节炎模型造模方式
- 佐剂诱导的大鼠关节炎模型(AIA):
(1) 适用动物:SD 大鼠、Wistar 大鼠等。
(2) 建模方法:抓取大鼠,在其后足或尾根部皮内注射 0.1mL 完全弗氏佐剂(CFA)即可建立模型。
(3) 特点:该模型中 T 细胞较为活跃,早期会产生大量的炎症因子,如 TNF-α、IL-17、IFN 等,后期会有大量的 IL-4、TGF-β等产生。不过,SD 大鼠造模成功率略低于 Wistar 大鼠,且 SD 大鼠体重变化较大,测量足趾肿胀时可能因大鼠本身原因产生较大误差。
- 胶原诱导的大鼠关节炎模型(CIA):
(1) 适用动物:SD 大鼠、Wistar 大鼠、Lewis 大鼠等,但大多用雌性动物进行造模,所选动物多在 180±20g 左右,7-8 周龄。
(2) 建模方法:将 II 型胶原与不完全弗氏佐剂(IFA)高速混匀乳化,大鼠麻醉后尾根部皮内注射 0.4mL 混匀的乳化胶原进行初次免疫,一周后再次进行免疫,二次免疫 3-7 天内即可得到模型。
(3) 特点:该模型主要是 Th 细胞介导,与人类类风湿性关节炎的发病机制有一定相似性,可用于研究类风湿性关节炎的发病机制及药物**等方面。在三种常用的大鼠品系中,雌性 Lewis 模型*为稳定,评价化合物药效较为真实可靠,且该模型持续时间可长达 50-60 天。
- 手术诱导的大鼠关节炎模型:
(1) 前交叉韧带切断模型:建模方法:大鼠麻醉后,暴露膝关节关节腔,用显微剪紧贴股骨剪断前交叉韧带,还可根据需特点:可模拟人体创伤后骨关节炎进程发展,能表现出早期的软骨退化、软骨下骨减少和晚期骨赘形成。但由于大鼠软骨层较薄,且生长板特殊,软骨细胞修复能力较强,因此用于骨关节炎的研究有一定的局限性。
(2) 半月板切除模型:与前交叉韧带切断模型类似,通过手术切除大鼠的半月板来诱导关节炎模型,该方法也能引起关节失稳和炎症反应,进而导致关节炎的发生。
- 尿酸钠诱导的大鼠痛风性关节炎模型:
(1) 适用动物:一般选用 6-8 周龄的雄性 SD 大鼠。
(2) 建模方法:将大鼠麻醉后,在其关节腔内注射尿酸钠(MSU)悬液,可引发关节滑膜及周围组织的炎症反应,模拟痛风性关节炎。
(3) 特点:该模型主要用于研究痛风性关节炎的发病机制和药物**,造模相对简单,但需要注意尿酸钠的浓度和注射剂量等因素,以确保模型的稳定性和可靠性。
2、手术诱导造模举例
- 实验动物分组:雄性健康SD大鼠30只,体重300-325g,随机均分为3组:假手术对照组(n=4,仅行膝关节囊切开术,不做其他处理);对照组(n=4,生理盐水zhiliao组);实验组(n=4,4-PBAzhiliao组)。
- 模型建立:对照组与实验组大鼠,乙醚诱导麻醉,以体积分数4%的水合氯醛腹腔注射麻醉(1ml/100g体重)大鼠,采用国际通用的造模方法前交叉韧带离断(ACL-T)及内侧半月板部份切除(PM)联合强迫运动建立大鼠膝OA模型。取大鼠右侧后肢膝关节前内侧切口,切开皮肤皮下组织,于髌前内侧切开关节囊,伸直位外翻髌骨,屈曲膝关节,探查关节腔无原发病变,暴露前交叉韧带,用显微剪剪断前交叉韧带,然后行内侧半月板切除术,注意勿损伤关节软骨面,无菌生理盐水冲洗手术区,复位髌骨,依次缝合关节囊、皮肤。术后不予固定患肢,每天以碘伏消毒手术切口,连续3d。所有大鼠手术后24h均进行隔天一次的强迫运动。
- 模型**:采用灌胃法给药,术前30分钟一次,术后每日灌胃一次,4-PBA剂量为1g/kg,平均每次2ml。生理盐水zhiliao组则相应给予近似容积的生理盐水。
3、达为科实验服务
分子实验平台:高效运作了qRT-PCR、Western blot、双向电泳技术、分子克隆与质粒构建、流式细胞仪检测、免疫共沉淀、染色质免疫共沉淀、RNA免疫沉淀、凝胶电泳迁移实验、酶联免疫吸附测定、外泌体抽提及鉴定等实验。
基因组学平台:可以完成甲基化检测、基因芯片分析、高通量测序等实验。
蛋白组学平台:能实现LC-MS、ITRAQ、蛋白质修饰分析等重点实验项目。
病理学平台:涉及免疫荧光染色、免疫组织化学染色、HE染色、特殊染色等实验。
临床前CRO服务:主要提供呼吸系统、神经系统、免疫系统性疾病的药效学评价服务,包括靶点验证、体内外模型的构建、药物筛选、药物分析、药效性评价、药代动力学和药理学研究以及院内制剂研发等。
项目转化服务:助力客户进行方案设计、联合课题申报、药物项目引进和孵化,解决客户对实验技术平台、专业人才、zhuanli申请和融资的需求;
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