智启医学新维度
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腹腔注射氯化锂(127mg/kg),用以易化匹罗卡品的致痫作用;18.5~23.5h后腹腔注射溴化甲基东莨菪碱(1mg/kg),用以减轻致痫剂匹罗卡品的外周胆碱能副反应;30min后腹腔注射匹罗卡品(60mg/kg);注射匹罗卡品后对大鼠的行为学表现进行观察,并根据Racine标准对每只大鼠的发作程度进行评定,癫痫持续状态(SE)规定为连续的全身性发作(4或5级发作,4级主要表现为直立,5级主要表现为直立并摔倒,均同时伴有全身阵挛性发作)或多个4或5级发作,并且行为学在90min发作间期内未恢复正常者。记录发作的时间潜伏期(从给药到SE开始的时间)。如给药30min后无SE发作,重复给药一次。SE 90min后,腹腔注射di xi pan(4mg/kg)终止发作,以避免痫性发作致死。发作程度<4级的大鼠剔除。饲养1周后观察,无自发性癫痫发作的大鼠剔除。给予抗癫痫药物苯妥英钠(PHT)75mg/kg腹腔注射一次,观察一周,仍出现癫痫发作的大鼠给予PHT 75 mg/kg腹腔注射一次,观察一周,仍出现癫痫发作的为成功模型。耐药相关指标研究 海马组织,突触前SV2A蛋白、突触后PSD-95蛋白、GluR2、miR-485
分子实验平台:高效运作了qRT-PCR、Western blot、双向电泳技术、分子克隆与质粒构建、流式细胞仪检测、免疫共沉淀、染色质免疫共沉淀、RNA免疫沉淀、凝胶电泳迁移实验、酶联免疫吸附测定、外泌体抽提及鉴定等实验。
基因组学平台:可以完成甲基化检测、基因芯片分析、高通量测序等实验。
蛋白组学平台:能实现LC-MS、ITRAQ、蛋白质修饰分析等重点实验项目。
病理学平台:涉及免疫荧光染色、免疫组织化学染色、HE染色、特殊染色等实验。
临床前CRO服务:主要提供呼吸系统、神经系统、免疫系统性疾病的药效学评价服务,包括靶点验证、体内外模型的构建、药物筛选、药物分析、药效性评价、药代动力学和药理学研究以及院内制剂研发等。
项目转化服务:助力客户进行方案设计、联合课题申报、药物项目引进和孵化,解决客户对实验技术平台、专业人才、zhuanli申请和融资的需求