智启医学新维度
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产品详情
简单介绍:
iTRAQ( Isobaric Tag for Relative and Absolute Quantitation)和TMT( Tandem Mass Tag)分别是由AB EX和Thermofisher开发的、用于标记肽段并结合LC-MS实现对多个样品的蛋白质组进行相对定量的试剂盒。iTRAQ有4标和8标两种规格,TMT有2标、6标和10标等三种规格。
详情介绍:
TMT
iTRAQ和TMT的技术原理一样,所不同的是二者的分子结构有差异。与SILAC相比(标记蛋白质),iTRAQ和
TMT是对肽段进行标记的。依据iTRAQ/TMT标签的质量数差异,通过MS实现对多组样品中的蛋白质进行相对定量:
SILAC是通过MS( MSl)对蛋白质进行定量,而iTRAQ/TMT是通过二级MS( MS/MS.MS2)进行定量的j
iTRAQ/TMT能兼容所有来源的蛋白质样品,并且能同时分析多达8-10组的样品,分析通量高。
1、分别提取蛋白质并定量;
2、Trypsin分别对蛋白进行酶解,提取肽段;
3、用不同质量数的iTRAQ/TMT标签分别对肽段样品进行标记:
4、标记完成后,混合样品,用SCX进行组分分离(15-20组分);
5、对每个组分进行LC-MS分析:
6、蛋白质鉴定与定量分析,筛选差异表达的蛋白;
7、生物学实验验证(Western blot,EUSA等):
技术优势
1、高通量,能同时进行多达8-10组样品蛋白质组的定性与定量分析;
2、兼容所有来源的样品(动植物组织、**、血液等);
3、实验周期短。