主营产品:
动物实验动物实验外包科研实验外包上海动物实验水迷宫实验外包动物实验外包公司动物造模动物模型构建动物行为学实验细胞实验细胞实验外包细胞培养实验细胞周期实验细胞增殖检测细胞凋亡检测
产品与服务

上海达为科生物科技有限公司

电话:021-55130726

传真:021-55130728

联系人:张艳

电话:18017844061

邮箱:jierdun@jrdbio.com

地址:上海市长江南路180号长江软件园B区B638室  



详细内容

**组化染色的质量控制

    一、组织固定

1、标本在离体后应立即浸泡于相当于标本体积8~10倍的标准固定液中,大标本要剖开固定。离体后标本固定前存放不得超过30分钟。

2、在实际工作中,就可操作性而言,10%的缓冲福尔马林是兼顾保存组织形态和抗原性通行的、被广泛接受的选择。

3、适度、适时的固定。一般而言,大标本只要做到及时切开固定,在室温下12小时即可达到固定要求;为了适应**组化染色标准化的需要,标本固定后应及时取材,通常固定时间不得超过24小时。

4、达到固定时间要求而不能及时进入脱水程序的标本,建议将标本置入70%的乙醇中进行暂时保存直至进入组织脱水程序。

脱水及制片

1、建立严格的组织脱水试剂规范化更换制度,组织处理质量。

2、切片厚度一般3~4µm,厚薄均匀、平整,无刀痕、折叠,采用高质量防脱载玻片。

3、切片在60℃烤箱内烤2~3小时,或者70 ℃烤箱内1小时。

4、脱蜡要和常规切片分开,使用单独的二甲苯,如果温度过低或二甲苯使用次数较多,可适当延长脱蜡时间。

二、抗原修复

抗原修复的方式有多种,热修复一般推荐高压锅热修复法,但是微波修复也有其方便的一面。影响抗原修复的基本因素是加热的温度和加热的时间,以及所使用的修复液的PH值。需要操作者在实际工作中摸索总结,同时要根据每种抗体的具体要求,找到较适合的修复方式。抗原修复的恰当与否,直接关系到**组织化学染色的成败,进一步影响后结果的正确判读。

三、抗体及检测系统的选择

选择优良的抗体和检测试剂盒,新买抗体要进行敏感性测试,找到佳的抗原修复条件,每次试验要设置相应的阳性和阴性对照。

试剂的使用在其有效期内,同时经常观察抗体使用过程中的结果变化,如不理想要及时更换。

四、显色和复染

不要忽视显色过程,和常规染色类似,显色不恰当也会造成染色的前功尽弃。不同的组织、不同的抗体显色时间有差异,必要时使用显微镜观察切片的显色效果。

苏木素复染过深过浅都会造成对比不清晰,不利于观察评价。
Copyright@ 2003-2020  上海达为科生物科技有限公司版权所有      电话:0756-2183150 传真: 地址: 邮编:
         沪ICP备15041491号     

沪公网安备 31011302004470号