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详细内容

PAS染色法(Periodic Acid-Schiff stain)

PAS染色法(Periodic Acid-Schiff stain) 又称过碘酸雪夫染色、糖原染色,在组织学上,主要用来检测组织中的糖类。过碘酸把糖类相邻两个碳上的羟基氧化成醛基,再与Schiff试剂的无色品红结合而呈紫红色。

随着医学实验技术的发展,糖原染色应用的范围更加广泛,如用以证明与鉴别细胞内空泡状的性质,心肌病变及其他心血管**的诊断,糖原累积病诊断和研究,糖尿病的诊断和研究,用于某些肿瘤的诊断等。

固定液

Carnoy固定液: 纯酒精60 ml 冰醋酸10ml氯仿 30ml,也可以选用75%酒精.

液配制

1) 过碘酸酒清夜配法:

过碘酸(HIO .2H O) 0.4g 95%酒精 35ml M/5醋酸钠(2.72g+蒸馏水100ml) 5ml蒸馏水10ml

保存于冰箱内,用棕色瓶,可用两周.

2)Schiff氏液:

0.5克碱性品红加入100毫升蒸馏水中,时时摇动三角瓶5分钟,使之充分溶解.冷却至50℃后过滤加入10毫升1N盐酸.冷却至25,加入0.5-1克偏重硫酸钠,在室温中至少静置24小时,然后密封冰箱保存.

3) Schiff氏酒精液配置 Schiff氏液 11.5ml 1N HCI 0.5ml 纯酒精 23ml

4) 亚硫酸水 1%偏重亚硫酸钠10ml 1N HCI 10ml 蒸馏水 180ml的树胶溶解。

5)哈瑞或迈耶苏木精

染色步骤

1. 石蜡切片脱蜡至水(细胞涂片,冰冻切片直接水洗)

2. 蒸馏水洗

3. 过碘酸酒清夜10min

4. 自来水冲洗10min

5. Schiff氏液10min

6. 流水冲洗5min

7.用哈瑞苏木精或迈耶苏木精染核3min(细胞核染色过深可用盐酸酒精分化)

8. 流水冲洗5min

9. 常规脱水、透明、封固

结果

PAS阳性为红色,细胞核蓝色。

注意事项

1、高碘酸溶液为透明溶液,长时间染色如果没有带入杂质的话此溶液一直是透明的,所以无法从常规的颜色辨别高碘酸的好坏,只有定期更换,根据标本的多少1~2月更换一次。

2、雪夫试剂要放入冰箱保存,临用前半小时取出恢复至室温,用后又倒回原瓶内放冰箱保存;雪夫试剂出现淡红色就不能继续使用了。

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