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详细内容

帕金森病小鼠模型行为学改变的定量观察

MPTP用于帕金森病小鼠模型制作5

小鼠对MPTP的敏感性存在种系和年龄的差异。一般选10~12周龄,体重25~30g成年C57BL褐鼠,按体重30~40 mgkg腹腔注射MPTP,连续7d。于第6~7次注射后出现暂时性(2~3h)躯干震额、竖毛、尾巴过伸、动作减少及爬杆试验障碍。

MPTP用于舶金森病小国模型制作时的一些注意事项6

a)小鼠种系对MPTP敏感性的影响 C57BL小鼠对MPTP为敏感,而CF-W小鼠、FVBN小鼠和Balb/C小鼠对MPTP的敏感性较C57BL小鼠稍差,CF-1CD-1MPTP的敏感性差。目前较常用的小鼠为C57BL/6小鼠

b)鼠龄对MPTP敏感性的影响 老龄鼠较青年鼠对MPTP更为敏感,这种敏感性的差异不仅表现在顺处理后的老龄鼠能够呈现更为明显的黑质多巴胺能神经元数目的减少,而且还能在顺处理后的老龄鼠身上观察到蓝斑区肾上腺紊能神经元数目的减少以及较典型的帕金森病行为学方面的改变

其他建立模型的方法

利血平模型 利血乎主要可以通过抑制去甲肾上腺素能神经元末梢的再摄取功能,使囊泡内贮存的多巴胺(DA)及其他的儿茶酚胺类递质耗竭。将雄性Wistar大鼠(体重280300g)腹腔内注射剂量的利血平后可使其出现骨伤肌慢硬、震颤、身体屈曲、运动过少以及其他的一些运动症状。神经化学分析发现大鼠纹状体内DA和其他单胺类递质的含量明显减少。因此.这类模型在程度上模拟了PD的临床表现和神经化学改变。但它存在明显的不足:一是**注射造成的运动障碍在不同时间和不同个体之间变异性较大;二是利血乎同时引起了多种递质释放并且无法造成类似PD的病理改变。因此该模型的应用只局限于探索**影响肌僵状态的实验中,对其他的运动症状的研究现已很少应用。

Fe3+模型 1991Ben-Shachar在雄性SD大鼠(250~300g)单侧黑质内注射Fe3+三周后可使其出现明显的运动行为改变,表现为在新环境中自主运动减少,短暂的僵直症状及自发的同测旋转行为。安菲它明(AMPH)可使这种同测旋转行为加强。神经化学研究发现同侧纹状体DA含量平均减少95%,并且其代谢产物34—二羟基***(DOPAC)和高香草酸(HVA)的含量也明显减低。组织病理学证实酪氨酸经化酶(TH)**染色阳性细胞大量减少,同时胶质细胞增生活跃。

机械损伤模型 研究发现机械损伤内侧前肋束(MF可以造成黑质内的DA能神经元进行性死亡。已经建立的造模方法有MFB独突切断术和中脑半切术,尤以前者应用较多。MFB切断术损伤模型的建立需要在大鼠脑立体定位仪上准确定住后,用特制的Scouten电线刀深入到MFB所在的部位将其切断。Brechne用此方法切断雄性CFHB大鼠(150180g)MFB后,分别于第12461016周计数DA能神经元的存活数目,发现约28%的黑质(SN)神经元在一周左右死亡,10周后约70%的细胞死亡。平均SN神经元存活数是29%。逆行追踪显示MFB切断成功率为92%~99%。可见,用该方法造模有如下优点:①成功率高,较为经济。②黑质DA能神经元呈现渐进性死亡,可以模拟PD病理变化的全过程,对于研究神经元的再生和PD的预防有的意义。缺点是切断术后短时间内,损伤的程度不稳定。

帕金森病小鼠模型行为学改变的定量观察

1)爬杆试验

2)悬挂实验

3)游泳实验

以上几种定量观察法为帕金森病小鼠模型行为学的研究提供了一些较为准确和客观的方法,同时也提高了整个实验的客观性。

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