主营产品:
动物实验动物实验外包科研实验外包上海动物实验水迷宫实验外包动物实验外包公司动物造模动物模型构建动物行为学实验细胞实验细胞实验外包细胞培养实验细胞周期实验细胞增殖检测细胞凋亡检测
产品与服务

上海达为科生物科技有限公司

电话:021-55130726

传真:021-55130728

联系人:张艳

电话:18017844061

邮箱:jierdun@jrdbio.com

地址:上海市长江南路180号长江软件园B区B638室  



详细内容

小鼠卵巢去势致骨质疏松症模型

    雌**在调节骨代谢及维持内环境的稳定性方面有着重要的作用,雌**水平低下被认为是导致骨质疏松症的主要原因。雌性大鼠双侧卵巢摘除是一个较成熟的动物模型,可以成功建立模拟雌**缺乏而导致的骨质疏松动物模型。这也为研究雌**缺乏对人体其他系统的损害奠定了基础。雌**是体内重要的**,它对骨代谢有着重要的作用。在对小鼠进行去势手术后,机体处于一种低雌**的微环境,骨转换过程加速,骨代谢加强,成骨细胞量降低,破骨细胞活跃,从而导致机体骨量丢失以及正常生理结构的破换,容易导致骨质疏。


实验动物 SPFBalb/c小鼠,健康,雌性未孕,4~6W,体重为18g~20g


实验分组 正常对照组、模型组、阳**组、受试药组三个剂量组,每组15只动物。


实验周期 12W


一、建模方法


1. 小鼠3%****钠40mg/kg腹腔麻醉后仰卧,腹部脱毛。


2. 在无菌条件下于腹股沟水平沿腹中线剪开皮肤及肌层,暴露腹腔。


3. 分离**并摘除卵巢,清理伤口后分两层缝合皮肤及基层,待小鼠清醒后,将其放回洁净笼具后放回饲养室饲养,定期观察小鼠状态及死亡情况并做好记录。


4. 术后3天,每只小鼠每天注射4万单位青霉素,防止感染。


5. 对照组仅摘除卵巢周围约1 g脂肪,而保留卵巢,其余处理相同。


6. 12W取材,X线测量各组小鼠骨密度(bone mineraldensity BMD),再腹腔注射麻醉,摘眼球取血,室温静止2h4℃离心机3000r/min离心10min,分离出上层血清,置-80℃冰箱保存备用。取小鼠胫骨标本用于病理学检测。


二、模型的评价


1.卵巢去势后小鼠体重、雌二醇及骨密度变化


去势组大鼠体重增长迅速,活动能力下降,毛色缺乏光泽而略灰暗,而对照组小鼠体重增加缓慢,毛色光亮,活动正常。去势组雌二醇水平及股骨 BMD 显著下降。


2.骨形态学染色


取各组小鼠胫骨标本,置入 10%中性甲醛缓冲固定液中(pH=7.2-7.44°C)固定 24-48h,再经 10%EDTA-2 Na 缓冲液(pH=7.44°C)脱钙,隔5-7d 更换脱钙液;脱钙后,梯度乙醇脱水,二甲苯透明,纵向石蜡包埋,5um 连续切片,常规 HE 染色。


对照胫骨骨小梁密集,相互交织成网状;模型组骨小梁数目明显减少,骨小梁变薄,呈断裂状。


3.细胞因子的检测

有研究发现,雌**的缺乏将导致机体自发的启动应激反应。去势后血清中IL-6 IL-8 IL-1β、TNF-α 的表达量增加,可以用ELISA 法检测。



Copyright@ 2003-2020  上海达为科生物科技有限公司版权所有      电话:0756-2183150 传真: 地址: 邮编:
         沪ICP备15041491号     

沪公网安备 31011302004470号