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小鼠卵巢去势致骨质疏松症模型

日期:2024-03-29 14:36
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摘要: 雌**在调节骨代谢及维持内环境的稳定性方面有着重要的作用,雌**水平低下被认为是导致骨质疏松症的主要原因。雌性大鼠双侧卵巢摘除是一个较成熟的动物模型,可以成功建立模拟雌**缺乏而导致的骨质疏松动物模型。这也为研究雌**缺乏对人体其他系统的损害奠定了基础。雌**是体内重要的**,它对骨代谢有着重要的作用。在对小鼠进行去势手术后,机体处于一种低雌**的微环境,骨转换过程加速,骨代谢加强,成骨细胞量降低,破骨细胞活跃,从而导致机体骨量丢失以及正常生理结构的破换,容易导致骨质疏。 实验...
    雌**在调节骨代谢及维持内环境的稳定性方面有着重要的作用,雌**水平低下被认为是导致骨质疏松症的主要原因。雌性大鼠双侧卵巢摘除是一个较成熟的动物模型,可以成功建立模拟雌**缺乏而导致的骨质疏松动物模型。这也为研究雌**缺乏对人体其他系统的损害奠定了基础。雌**是体内重要的**,它对骨代谢有着重要的作用。在对小鼠进行去势手术后,机体处于一种低雌**的微环境,骨转换过程加速,骨代谢加强,成骨细胞量降低,破骨细胞活跃,从而导致机体骨量丢失以及正常生理结构的破换,容易导致骨质疏。


实验动物 SPFBalb/c小鼠,健康,雌性未孕,4~6W,体重为18g~20g


实验分组 正常对照组、模型组、阳**组、受试药组三个剂量组,每组15只动物。


实验周期 12W


一、建模方法


1. 小鼠3%****钠40mg/kg腹腔麻醉后仰卧,腹部脱毛。


2. 在无菌条件下于腹股沟水平沿腹中线剪开皮肤及肌层,暴露腹腔。


3. 分离**并摘除卵巢,清理伤口后分两层缝合皮肤及基层,待小鼠清醒后,将其放回洁净笼具后放回饲养室饲养,定期观察小鼠状态及死亡情况并做好记录。


4. 术后3天,每只小鼠每天注射4万单位青霉素,防止感染。


5. 对照组仅摘除卵巢周围约1 g脂肪,而保留卵巢,其余处理相同。


6. 12W取材,X线测量各组小鼠骨密度(bone mineraldensity BMD),再腹腔注射麻醉,摘眼球取血,室温静止2h4℃离心机3000r/min离心10min,分离出上层血清,置-80℃冰箱保存备用。取小鼠胫骨标本用于病理学检测。


二、模型的评价


1.卵巢去势后小鼠体重、雌二醇及骨密度变化


去势组大鼠体重增长迅速,活动能力下降,毛色缺乏光泽而略灰暗,而对照组小鼠体重增加缓慢,毛色光亮,活动正常。去势组雌二醇水平及股骨 BMD 显著下降。


2.骨形态学染色


取各组小鼠胫骨标本,置入 10%中性甲醛缓冲固定液中(pH=7.2-7.44°C)固定 24-48h,再经 10%EDTA-2 Na 缓冲液(pH=7.44°C)脱钙,隔5-7d 更换脱钙液;脱钙后,梯度乙醇脱水,二甲苯透明,纵向石蜡包埋,5um 连续切片,常规 HE 染色。


对照胫骨骨小梁密集,相互交织成网状;模型组骨小梁数目明显减少,骨小梁变薄,呈断裂状。


3.细胞因子的检测

有研究发现,雌**的缺乏将导致机体自发的启动应激反应。去势后血清中IL-6 IL-8 IL-1β、TNF-α 的表达量增加,可以用ELISA 法检测。



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