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细胞实验


     目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质能提高细胞膜对水的通透性,加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外,减少细胞内冰晶的形成,从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法,这样可以细胞外结晶在很短的时间内即融化,避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。

当细胞冷到零度以下,可以产生以下变化:细胞器脱水,细胞中可溶性物质浓度升高,并在细胞内形成冰晶。

     如果缓慢冷冻,可使细胞逐步脱水,细胞内不致产生大的冰晶;相反,结晶就大,大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重结晶。同时慢冻程序有很多注意事项, 从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存,但好为对数生长期细胞。在冻存前一天好换一次培养液; 将冻存管放入液氮容器或从中取出时,要做好防护工作,以免**;  冻存和复苏好用新配制的培养液。

    细胞冻存和复苏有很多作用,比如:用于生物学保种;用于医学上干细胞研究;用于传代培养。

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