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Morris水迷宫实验流程准则

1、 实验时间:隐蔽站台试验一般设计天数为4天或者6天,如果是年老体弱鼠可以将天数设计为4天。训练时间一般为60s90s,也有用120s的,不过现在一般都改用60s了,有人做过实验,大鼠在60120s之间能够找到隐藏站台的次数差异大约只占其找到平台总次数的5%,这在统计学上是“小概率事件”。也就是说,大鼠在60s内找不到隐藏站台的话,再延长到120s也很难找到。而且60s还可以减小各组的标准差,可以节约实验时间。但问题并非如此简单,隐蔽站台试验潜伏期应采用重复测量,由于在统计时,很多研究将最大潜伏期直接纳入统计,显然,最大潜伏期的不同将不可避免地影响统计结果。所以从统计学上了解不同的最大潜伏期到底对Morris水迷宫实验结果有多大的影响,如何避免因此带来的系统  误差等问题尚有待进一步研究。国外文献报道,如果水池的直径在2m,可以设置单次训练时间为120s,直径在1m1.5m,选择训练时间为60s,鉴于此,我们认为训练时间60s较为合适。时间过长,对鼠体力消耗也会过大。  

2、 实验次数:在隐藏站台试验中,每天训练4次,每个象限每天只被使用一次,一定不要将大鼠连续地放入同一个象限,因为大鼠可能会凭借位置或其他非记忆信息(如向右转弯)来定位站台。而且,接下来每天的象限顺序应当改变。在空间探索试验中,将大鼠置于水池中追踪120s,这个过程需要重复一次,因为在有些情况下,首次实验会观察到一些非正常变量,可能一些老鼠在改变了实验条件后迷失了方向。连续进行的两次实验计算平均值可以减少偏差,可以提供一个较高的精度和对先前学习记忆的较好控制。但是如果实验次数多于两次,将会导致在目的象限活动时间减少,得到不准确的空间探索结果。


3、   实验动物:并非所有鼠株都适合于Morris迷宫测试,如近交系BALB/c小鼠不能学会该任务(成绩并不随天数的增加而进步),129/SvJ小鼠的学习成绩也偏差;比如129/SvJ株的小鼠由于有年龄相关性视路病变,在衰老时完成以视觉为基础的学习记忆任务时就会出现困难。在C57BL/6鼠,由于严重的秃头症存在,可能使某些小鼠产生抑郁,加上溃疡性皮炎,最终可能影响小鼠的游泳能力而影响实验成绩;将动物浸入水中可能引起内分泌或其它应激效应,后者与脑损害或药理学操作间的相互作用具有不确定性;由于体力消耗太大,体温也丧失过多,一些年老体弱鼠完成任务较困难,甚至会发生溺水死亡的情况;另外,个体间的成绩差异也巨大,比如说,有些正常大鼠放入水中后左右观望打圈确定方向后直接游到台上,说明他记忆力比较好,这个现象是很重要的,有的大鼠游泳速度慢些  所以潜伏期时间比痴呆组还大。所以可以先用别的方法把大鼠初筛一下,然后再来跑水迷宫。  

4 实验人员:实验者应与受试动物建立良好的感情,让动物熟悉实验者的身体信息,如气味、相貌等。捕捉动物的动作要温柔,不要刺激动物。忌讳用手抓鼠的尾巴,因为这样会极大的刺激动物。有人建议在实验开始的两三天之前,与鼠亲密接触。实际上鼠的嗅觉很敏感,如实验人员为女性的话,其身上的香水味不同,都会使鼠的情绪发生变化的。  

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