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磁珠分选的原理及各类磁珠的优缺点

**磁珠法分离细胞原理:

      **磁珠法分离细胞是基于细胞表面抗原能与连接有磁珠的特异性单抗相结合,在外加磁场中,通过抗体与磁珠相连的细胞被吸附而滞留在磁场中,无该种表面抗原的细胞由于不能与连接着磁珠的特异性单抗结合而没有磁性,不在磁场中停留,从而使细胞得以分离。

**磁珠法分为正选法和负选法:

正选法-磁珠结合的细胞就是所要分离获得的细胞。

负选法-磁珠结合不需要的细胞,游离于上清液的细胞为所需细胞。

一般而言,负选法比正选法的磁珠用量大。

磁珠: 大小在0.1-0.45mm 包被了生产的高质量单抗磁珠已为白细胞亚群的分选所优化 将包被了特异性单抗的BD IMag磁珠加入细胞悬液,磁珠特异性地与有相应抗原的细胞亚群结合,通过分离得到的连有磁珠的细胞可直接用于功能试验和用流式细胞仪检测。

磁分离细胞的重要指标是:

      纯度和得率,这取决于磁珠所连接单抗的特异性和磁珠大小(磁性),然而太小的磁珠得率不高,太大的磁珠又会影响细胞活性,也无法直接上流式。

磁珠 优点:对细胞温和,不影响分离细胞的后续培养,可直接上流式检测,不影响散射光。

小磁珠 缺点:需要很强的磁场来分离细胞,分离速度慢,得率不高,需要一次性的分离柱,不能在普通试管进行,成本昂贵。

大磁珠 优点:技术简单,分离可在试管中完成,易于增减细胞用量,速度快,得率高,成本低。

大磁珠 缺点:对细胞造成机械压力,影响其生物学活性,不利于分离后培养,纯度低,阻塞FCM的喷嘴  。

 

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