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疫荧光技术有哪些分类

日期:2024-05-07 17:31
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摘要: 免疫荧光技术的原理 免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性,所以当抗原抗体发生反应时,只要知道其中的一个因素,就可以查出另一个因素。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。 技术特点 该技术的主要特点是:特异性强、敏感性高、速度快。主要缺点是:非特异性染色问题尚未解决,结果判定的客观性不足,技术程序也还比较复杂。 荧光免疫法按反应体系及定量方...

   免疫荧光技术的原理

免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性,所以当抗原抗体发生反应时,只要知道其中的一个因素,就可以查出另一个因素。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。

技术特点

该技术的主要特点是:特异性强、敏感性高、速度快。主要缺点是:非特异性染色问题尚未解决,结果判定的客观性不足,技术程序也还比较复杂。

荧光免疫法按反应体系及定量方法不同,还可进一步分做若干种。与放射免疫法相比,荧光免疫法无放射性污染,并且大多操作简便,便于推广。国外生产的TDM用试剂盒,有相当一部分即属于此类,并且还有提供TDM荧光偏振免疫分析用的自动分析仪生产。

由于一般荧光测定中的本底较高等问题,荧光免疫技术用于定量测定有困难。新发展了几种特殊的荧光免疫测定,与酶免疫测定和放射免疫分析一样,在临床检验中应用。

直接法

将标记的特异性荧光抗体,直接加在抗原标本上,经的温度和时间的染色,用水洗去未参加反应的多余荧光抗体,室温下干燥后封片、镜检。

间接法

如检查未知抗原,先用已知未标记的特异抗体(抗体)与抗原标本进行反应,用水洗去未反应的抗体,再用标记的抗抗体(**抗体)与抗原标本反应,使之形成抗原—抗体—抗体复合物,再用水洗去未反应的标记抗体,干燥、封片后镜检。如果检查未知抗体,则表明抗原标本是已知的,待检血清为抗体,其它步骤的抗原检查相同。

标记的抗抗体是抗球蛋白抗体,同于血清球蛋白有种的特异性,如免疫抗鸡血清球蛋白只对鸡的球蛋白发生反应,因此,制备标记抗体适用于抗原的诊断。

技术分类

⑴ 荧光抗体技术

抗原抗体反应后,利用荧光显微镜判定结果的检测方法。

⑵免疫荧光测定

抗原抗体反应后,利用特殊仪器测定荧光强度而推算被测物浓度的检测方法

 

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