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实验外包助手—WB的步如果做到

SDS-PAGE作为一个老生常谈的实验,早已广为科研者所知。然而该实验虽然基础,但是细节繁琐,耗时长久,光是配制试剂就要花费2个小时左右。而这还只是Western blot(WB)的步,也使得完成WB实验将会耗费2天左右的时间。

实验中种种试剂、抗体等等均是完成实验这座大厦的基石,如果基石打不牢,实验很有可能会半路夭折。而实验中痛苦的莫过于与实验结果就差那么一步之遥。

以Western blot(WB)为例,这眼瞅着就要到条带现身的奇迹时刻,却愣是让曝光试剂的匮乏给硬生生的截断了见证过程,又怎会不让人懊恼上火呢?

其实,上述窘境皆是科研者在实验前准备不足所致,若是能提前发现试剂的不足,或对试剂重新订购,又或者重新配制溶液,均能再次推进实验进程。然而就这订购或配制试剂的过程无疑会消耗我们的时间以及精力。

那么为了避免原材料浪费以及节省更多的时间,SDS-PAGE电泳过程中的一些试剂还是早早的配制并妥善保存起来为好,如此方可以备不时之需。

缓冲液(buffer):

关于这一点,你可能早已知晓,但再次重复一遍也不是坏事。实验中可将所有的凝胶缓冲液进行一次性大量配制,如此可方便后续实验中对其的使用。至于配制的浓度,10x浓度是实验室配制母液常用的浓度。

有些实验室会多次重复利用这些凝胶电泳缓冲液,在这种情况下,建议每次使用buffer时均要在缓冲瓶上贴一个标签,已记录使用的次数,超过期限后就要对缓冲液进行重新配制,以免对实验结果造成影响。

过硫酸铵(APS):

小编在接触SDS-PAGE电泳之初,每次配胶时均会制备新鲜的APS,可后来发现溶解后的APS在分装后,可在-20℃冰箱中得以长期储存。

另外,如果你需要经常使用SDS-PAGE凝胶,那么可取出一只分装后的APS溶液,将其置于4℃冰箱里,可其一个月不会过期。

缓冲液不够用?准备些弹珠吧

有时,实验过程中,你会忽然发现没有足够的电泳缓冲液,此时一个节省时间的方法就是在现有电泳缓冲液添加一些弹珠(是的,就是我们小时候曾经玩过的),以提高缓冲液的高度水平来缓冲液能没过上样孔。

但是要这些弹珠是洁净的,否则一旦其对上样的蛋白样品造成了污染,就不要妄想此次实验会得到一张漂亮的实验结果图片了。

这次就先为大家分享这些技巧,希望您多多关注实验外包助手。







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