主营产品:
动物实验动物实验外包科研实验外包上海动物实验水迷宫实验外包动物实验外包公司动物造模动物模型构建动物行为学实验细胞实验细胞实验外包细胞培养实验细胞周期实验细胞增殖检测细胞凋亡检测
产品与服务

上海达为科生物科技有限公司

电话:021-55130726

传真:021-55130728

联系人:张艳

电话:18017844061

邮箱:jierdun@jrdbio.com

地址:上海市长江南路180号长江软件园B区B638室  



详细内容

结缔组织类细胞培养

一、成纤维细胞培养

用人或动物胚体为好;动物可用小鼠或鸡胚,去头和内脏,剪成小碎块后,用胰蛋白酶消化法培养;如为人胚,可取皮肤培养。幼儿包皮是培养成纤维细胞的很好对象。

二、巨噬细胞培养

1.实验前三天,向每只小鼠腹腔内注入无菌硫羟乙酸肉汤1ml(勿注入肠内)。

2.引颈杀死动物,手提鼠尾将全鼠浸入70%酒精中3~5秒。

3.置动物于解剖台上,用针头固定四肢,双手持镊撕开皮肤拉向两侧,暴露出腹膜,但勿伤及腹膜壁。

4.再用70%酒精擦洗腹膜壁后,用注射器吸10ml Eagle液注入腹腔中,同时从两侧用手指揉压腹膜壁,令液体在腹腔内充分流动。

5.用针头轻轻挑起腹壁,使动物体微倾向一侧,使腹腔中液体集于针头下吸取入针管内。

6.小心拔出针头,把液体注入离心管中,250g 4℃离心10分钟,去上清,加10 ml Eagle培养基。

7.计数细胞,每只小鼠可产生20~30×105细胞,其中90%为巨噬细胞。

8.为获取3×105个帖附细胞/平方厘米,需接种2.5×106/ml。

9.为纯化培养细胞,去除其它白细胞,在细胞培养接种数小时后,去除培养液,用Eagle液冲洗1~2次后,再加新Eagle培养液置37℃ CO2温箱中培养。


Copyright@ 2003-2020  上海达为科生物科技有限公司版权所有      电话:0756-2183150 传真: 地址: 邮编:
         沪ICP备15041491号     

沪公网安备 31011302004470号