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为何实际蛋白条带与预测的不相同?


为何实际蛋白条带与预测的不相同?

 

蛋白**印迹(Westernblotting)是一种根据尺寸大小来分离蛋白质的技术。一般来说,蛋白质越小,其在凝胶中移动的速度越快。然而,移动速率也会受到其他因素的影响,因此实际跑出的蛋白条带可能会与预测的不一致。有下面这些可能的因素:

1. 后翻译修饰——如发生了磷酸化修饰、糖基化修饰等,会导致蛋白质变大; 

2. 后翻译剪切位点——许多蛋白先合成蛋白前体,然后再通过切割一部分来形成活性蛋白,例如半胱天冬蛋白酶前体;

3. 剪接变异体——同一基因的选择性剪接会产生不同大小的蛋白质;


4. 相关的电荷性质——氨基酸组成(带电荷与不带电荷的);

5. 多聚体——如蛋白质的二聚作用。这通常是防止在还原状态下,蛋白质发生强烈的反应而导致蛋白质变大。

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