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大鼠髓核细胞的原代培养总结会
日期：2024-05-09 20:25
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摘要：上海达为科生物科技有限公司，位于上海长江软件园，公司目前具备较好的生物学、医学技术服务平台，能够为广大客户提供医学科研样本检测、合作研究、开发及生产服务。 我们拥有专业的实验室、先进的实验设备和经验丰富的科研技术人员。技术团队包括研究员（博士后）2人，助理研究员（博士）4人，核心研究员（硕士）15人，致力于动物模型、动物实验、动物实验外包、整体实验外包，细胞实验、细胞实验外包、整体毕业课题等等。
2024年4月18日，周四，公司组织，由实验室主管刘博主导，实验室全体成员参与，对大鼠髓核细胞的原代培养的相关知识点，进行了培训与交流。本次会议，主要针对小鼠骨髓源性巨噬细胞的种植模型，刘博就实验方法深入进行了讲解，实验室人员展开激烈的讨论。以下为讨论内容的总结：
1.脱臼法处死SD大鼠，剃毛，75%酒精浸泡5min。
2.从尾椎处剪开皮肤，取出腰椎。用含2%双抗的PBS冲洗3-5次。
3.分离椎节，切开纤维环分离凝胶状髓核，将凝胶状髓核置于PBS中冲洗3次，去除血迹，剪碎髓核组织呈1mm3大小，移至离心管后加入5倍体积的1.5%Ⅱ型胶原酶，37℃摇床消化2h。
4.消化结束，20%FBS终止消化，100um滤网过滤，1000r/min离心5min，弃上清后DMEM/F12重悬，按1×105/ml接种于培养板，加入含1%双抗和 15% FBS 的 DMEM/F12，置于37 ℃细胞培养箱中培养。
5.4d后换液，以后每3天换液 1 次，细胞达 90% 融合后传代。
本次会议，提升公司对小鼠骨髓源性巨噬细胞的种植模型的重要知识点的认知，针对相关实验，更好的把控实验质量，提高了公司在这方面的经验积累。
