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活性氧ROS检测
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活性氧ROS检测

活性氧(reactive oxygen species, ROS)是生物体内一些氧化反应中形成的氧自由基,常见有超氧化阴离子(O2-),过氧化氢(H2O2),过氧化自由基(ROO-)和氢氧自由基(OH-)等形式。自由基外层具有非配对电子,其化学性质非常活泼,它既是电子供体,又是电子受体。活性氧是生命活动中不可缺少的活性物质。自由基在体内可提高一些酶的活性,如核苷酸的合成和肝脏的**过程中,自由基可激活某些合成酶或**酶。自由基还参与机体内一些活性物质如前列腺素的合成。炎症过程中,自由基可促进炎性细胞吞噬**和杀死**,如中性粒细胞发生呼吸爆发时产生大量自由基,可杀死病原体。


ROS更多被赋予明确的病理意义。ROS可对细胞膜结构、核酸和蛋白分子产生氧化作用,引起其结构和功能障碍。ROS增多导致机体氧化应激反应(Oxidative Stress)造成细胞损伤,参与多种病理机制。百种以上的**状态都可能有ROS的参与。机体通过一系列抗氧化机制,维持ROS的平衡,如超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase, SOD)、过氧化氢酶(Catalase)等酶类和一些小分子还原物质,可去除细胞生成的ROS。检测细胞ROS的含量,可以了解ROS在细胞一些生理和病理状态中的变化,分析**效应和相关机制。


ROS检测原理:活性氧检测时会利用荧光探针DCFH-DA。DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜,从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。检测DCF的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。

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