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蛋白质组学
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蛋白质是生命功能的执行者,其含量的变化在生物体的生长、环境应激、**发**展等过程中发挥着重要的作用。从DNA转录为mRNA再翻译为蛋白质的过程中涉及到一整套精细的表达调控机制,如转录调控、转录后调控、翻译调控、翻译后调控等。相比较表达谱芯片和转录组测序而言,蛋白质组研究反映了蛋白质的表达水平,比从mRNA、miRNA水平推测目的蛋白的表达水平要直接的多,因为生物学功能终还是由蛋白质直接实现的。因此,同步检测mRNA和蛋白质的表达量并进行联合分析已成为生物学研究的必然趋势。

蛋白质组学
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蛋白质组学

    目前,应用于蛋白质组学研究的技术主要有:荧光双向差异电泳技术(2D-DIGE),同位素亲和标签技术(ICAT),细胞培养稳定同位素技术(SILAC),可溶性聚合物同位素技术(SoPIL),同位素的相对和定量技术(iTRAQ)。其中,iTRAQ技术利用多种同位素试剂标记蛋白多肽N末端或赖氨酸侧链基团,经高精度质谱仪串联分析,可同时比较多达8种样品之间的蛋白表达量,是目前应用广泛的定量蛋白质组学技术。

蛋白质组分析(proteomics) 是对生物蛋白组(proteome) 的分析与检测,蛋白组分析要将混合蛋白质分离, 分离的主要方法是蛋白双向电泳。已被分离的蛋白质由质谱分析对其进行鉴定。

质谱检测主要有三种方式:

          1)基质辅助激光解析电离质谱技术(MALDI - TOF - MS )
          2) 电喷雾电离串联飞行时间质谱技术(ESI- TOF- MS)
          3) 表面增强激光解析离子化-飞行时间质谱技术 (SELDI- TOF- MS)
   前两种技术分别针对高分子量蛋白质和低分子量蛋白质的检测,第三种技术集蛋白质芯片和质谱于一身,具有灵敏度高,样本要求低等特点,可同时检测高分子量和低分子量蛋白质,目前被广泛应用于恶性肿瘤标志物筛选的研究。






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